目的探讨人工智能（AI）在《临床微生物学检验技术》教学中的应用实践。方法选取2024年1月至2025年6月川北医学院检验医学院328名医学检验专业本科生作为研究对象，分为对照组和实验组，2组均以“学习通”APP作为线上教学互动平台，实施线上线下混合式教学。实验组增加AI技术融入课程教学的环节。采用SPSS27.0统计软件进行学习成绩t检验;通过问卷描述性统计分析2组教学效果。结果实验组线上考核成绩、实验成绩、期末总成绩及各类题型成绩均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；实验组使用AI后每篇随堂测试成绩也高于第1次，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验组95%以上的学生认为AI赋能的课程能提高学习效果。结论AI具有赋能《临床微生物学检验技术》课程教学体系重构的现实必要性。该研究通过过程性评价证明了AI多元化教学实施的可行性，并针对问卷调查所发现的问题提出了优化对策，有利于进一步增强实施方案的广泛适配度和学生学习能力的可持续性提高，是一种值得应用推广的教学方法。