目的探讨血清Smad同源物7（Smad7）、胸腺基质淋巴生成素（TSLP）在新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）诊断及病情判断中的价值。方法选取2021年4月至2023年4月该院收治的98例确诊为NEC的患儿为观察组，根据病情严重程度分为重症组（38例）和轻症组（60例）。另选取同期在该院出生的98例健康新生儿为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清Smad7相对表达量，采用酶联免疫吸附试验检测血清TSLP水平；采用Spearman相关分析NEC患儿血清Smad7、TSLP水平与病情严重程度的相关性；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清Smad7、TSLP水平对重症NEC的诊断价值。结果与对照组比较，观察组血清Smad7、TSLP水平明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与轻症组比较，重症组血清Smad7、TSLP水平明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。 血清Smad7、TSLP水平与病情严重程度均呈正相关（r=0.486，P＜0.001；r=0.421，P＜0.001）。血清Smad7、TSLP诊断重症NEC的曲线下面积（AUC）分别为0.800、0.750，二者联合检测诊断重症NEC的AUC为0.850，二者联合检测的AUC明显大于血清Smad7、TSLP单独检测的AUC（Z=2.074,P=0.038;Z=1.974,P=0.048）。结论NEC患儿的血清Smad7、TSLP水平均上调，且与病情严重程度关系密切，二者联合检测对重症NEC具有较高的诊断价值。