目的验证血小板源性生长因子受体β/磷酸肌醇3-激酶（PDGFRβ-PI3K）相互作用对于介导骨折后强大的骨膜细胞活化是否有必要。方法收集正常活动或骨折手术后3 d的小鼠骨膜细胞进行体外原代培养，分为空白组、阴性组、shPDGFβ组和各预处理组，空白组不做任何处理，阴性组和shPDGFβ组分别转染对照shRNA和PDGFRβ shRNA慢病毒，72 h后用于实验，各预处理组包括用生长因子（PDGF-BB，10 ng/mL）、PDGFR抑制剂（SU16f，5 μmol/L）、小分子AKT激活剂（SC79，4 μg/mL）或PI3K激活剂（740 Y-P，25 nmol/L）单独或序贯处理30 min。采用Western blot试验、流式细胞术、EdU染色实验检测各组细胞蛋白表达水平和增殖活力。结果与正常活动小鼠的骨膜细胞比较，骨折小鼠的骨膜细胞中PDGFRβ蛋白表达水平升高约2.31倍。通过流式细胞术验证，骨折小鼠骨膜细胞中PDGFRβ阳性率为（73.26±3.17）%。在骨折小鼠的骨膜细胞实验中，shPDGFRβ组细胞p-AKT蛋白表达水平均低于空白组和阴性组，差异均有统计学意义（P<0.05）；而PDGF-BB组和SC79组细胞p-AKT蛋白表达水平一致，差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白组（PI3K：1.22±0.09，p-Tyr-PDGFRβ：0.01±0.01）比较，PI3K激活剂740 Y-P组可上调PI3K水平（1.67±0.13）和p-Tyr-PDGFRβ水平（0.07±0.01），差异均有统计学意义（P＜0.05），但对PDGFβ水平无明显干扰。另外，与740 Y-P组［p-AKT（Ser473）：0.32±0.03］比较，740 Y-P+PDGF-BB组进一步上调了骨膜细胞中p-Tyr-PDGFRβ水平（0.19±0.01）和p-AKT（Ser473）水平（0.51±0.05），差异均有统计学意义（P＜0.05）。在体外增殖实验中，没有对于用740 Y-P预处理的细胞，加入PDGF-BB后，细胞增殖活性几乎恢复至阴性组水平，明显高于未用740 Y-P预处理的细胞。结论PDGFRβ-PI3K信号轴对于骨折愈合早期阶段的骨膜活化是有必要的。